今日,華中農(nóng)業(yè)大學在Scientific Reports上發(fā)表了多位點CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在甘藍型油菜中的應(yīng)用。題目為: CRISPR/Cas9-mediated genome editing efficiently creates specific mutations at multiple loci using one sgRNA in Brassica napus .
CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在許多植物物種中都得到廣泛的應(yīng)用,但是在四倍體甘藍型油菜中還沒有高效的編輯系統(tǒng)。在本研究中,探索了CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對12個基因突變效率,并確定了這些基因編輯在甘藍型油菜中的模式、特異性和遺傳力。從表1中的數(shù)據(jù)來看,T0代單基因靶點的平均突變率達到65.3%。從表2中的數(shù)據(jù)來看,將sgRNAs的靶標設(shè)計到同源基因的保守區(qū)域,突變的頻率范圍從27.6%到96.6%。并且很容易發(fā)現(xiàn)純合子植株。包括雙等位基因純合子,雜合子在內(nèi)的48.2%的基因突變可以穩(wěn)定遺傳,并作為經(jīng)典的孟德爾基因在下一代(T1)沒有任何新的突變或逆轉(zhuǎn)。此外,在所檢測的T0植物中,在預測的脫靶位點沒有發(fā)現(xiàn)突變。研究結(jié)果表明,CRISPR/Cas9是創(chuàng)建有針對性的基因組修飾在多個位點的穩(wěn)定和甘藍型油菜的遺傳的有效工具。這些發(fā)現(xiàn)為油料作物生物技術(shù)應(yīng)用開辟了許多途徑。
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